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奧瑞達(dá)生物給您講解ELISA試驗(yàn)檢測(cè)的質(zhì)量分析

發(fā)布時(shí)間: 2024-04-09  點(diǎn)擊次數(shù): 1227次

ELISA方法現(xiàn)在已經(jīng)被廣泛的應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。拋開試劑盒本身質(zhì)量外,我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中也有很多因素都會(huì)影響試驗(yàn)的正常結(jié)果。其中最常出現(xiàn)的問題是顯色淡,靈敏度偏低、重復(fù)性不佳、假陽性結(jié)果和假陰性結(jié)果,不管出現(xiàn)什么樣的結(jié)果都會(huì)直接影響我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下面來分析ELISA實(shí)驗(yàn)非正常檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的常見原因,并分析其解決辦法,以提高檢測(cè)質(zhì)量。

1、方法學(xué)的影響

ELISA 測(cè)定模式包括以下幾種: 雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM 抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法, 其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法因受操作時(shí)差所引起的競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響, 結(jié)果重復(fù)性較差, 質(zhì)量較難控制。

2、試劑因素

試劑的選擇 檢測(cè)的原理均基于抗原抗體反應(yīng)。由于該反應(yīng)過程受多種因素的影響, 如普遍存在基質(zhì)效應(yīng)、交叉反應(yīng)等, 因而檢測(cè)結(jié)果難以溯源, 不同方法、不同試劑之間甚至同一試劑不同批號(hào)間結(jié)果均缺乏可比性。試劑質(zhì)量在很大程度上決定了檢測(cè)的水平, 因此在引入新項(xiàng)目之前必須對(duì)試劑進(jìn)行嚴(yán)格的評(píng)估。試劑的評(píng)估有以下幾個(gè)步驟: (1) 確定開展該項(xiàng)目的必要性; (2) 了解該項(xiàng)目現(xiàn)有的檢測(cè)方法和原理; (3) 在了解試劑的組成基礎(chǔ)上選擇多家試劑盒進(jìn)行比較,判斷標(biāo)準(zhǔn)參考方法或參考物質(zhì), 其次為臨床的滿意度及機(jī)構(gòu)的報(bào)告如各級(jí)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)、CDC 報(bào)告等; (4) 定期對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行追蹤反饋直至最終認(rèn)可該試劑。

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