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奧瑞達生物淺談如何區(qū)分雙抗夾心法、間接法和競爭法

發(fā)布時間: 2022-10-28  點擊次數: 1870次

近年來,ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點得到了廣泛的應用,ELISA試劑盒根據試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,又分為雙抗夾心法、間接法、競爭法等幾種類型。

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那么,這幾種類型分別應用于哪些實驗?這些類型的優(yōu)缺點又是什么呢?請繼續(xù)往下看!

雙抗體夾心法測抗原:雙抗體夾心法是檢測抗原常用的方法,適用于測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點夾心。

雙抗原夾心法測抗體:反應模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結合物,以檢測相應的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體。此法中受檢標本不需稀釋,可直接用于測定,因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關鍵在于酶標抗原的制備,應根據抗原結構的不同,尋找合適的標記方法。


間接法:是檢測抗體常用的方法,本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。 

競爭法測抗體:當抗原材料中的干擾物質不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合??笻Be的檢測一般采用此法。 


競爭法測抗原:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,可以采用競爭法模式。其原理是標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結合。標本中抗原量含量愈多,結合在固相上的酶標抗原愈少,最后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。


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