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檢測靈敏度

發(fā)布時間: 2022-07-29  點擊次數(shù): 1441次

定義“超靈敏"
對傳統(tǒng)的ELISAz強烈的要求是具有超靈敏檢測的能力。然而,“超靈敏"一詞經(jīng)常被曲解。其中一個原因是與聚合酶鏈式反應(PCR)的檢測限(LOD)進行了比較。聚合酶鏈式反應可以擴增核酸,從而檢測出少量的DNA或RNA拷貝數(shù)。例如,實時PRC的LOD是各種核酸的幾個拷貝數(shù)/檢測。然而,實時PCR和蛋白質檢測系統(tǒng)之間的LOD無法進行比較,"超靈敏 "一詞用于蛋白質定量是不準確的。
誤解 "超靈敏 "的第二個原因是源于在其他各種蛋白質檢測方法中對LOD的比較。如上所述,許多技術可以用來量化目標蛋白,包括ELISA、LC-MS和芯片實驗室方法。而z低的方法可能被認為是'超靈敏'的方法,優(yōu)于其他方法,但這是不合適的,因為僅僅根據(jù)檢測限來比較方法,而不考慮對特殊儀器或特殊房間的需求以及成本,是沒有用的。也就是說,"超靈敏 "這個詞并不意味著一個具體的數(shù)值。那么什么是 "超靈敏"?
澳大利亞新南威爾士大學的J. Justin Gooding最近詳細討論了這個問題?;瘜W家和生物學家對 "超靈敏"一詞的使用是不同的。為了以跨學科的方式定義該術語,他將超靈敏生物分析傳感器定義為 "具有足夠靈敏度和低背景的生物傳感器,可以達到亞皮摩爾檢測極限"。他還解釋說,"這是靈敏度的含義在化學和生物學之間的折中,承認檢測限的化學意義與靈敏度之間的聯(lián)系,因為它與背景信號有關"。10-13摩爾/升或更小的檢出限可以被稱為"超靈敏"檢測。如果我們使用96孔微孔板進行ELISA,一次測定體積一般等于100μL。因此,10-13摩爾/升相當于10-17摩爾/次,這可能很難實現(xiàn)。

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